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數(shù)字PCR

技術(shù)介紹：
數(shù)字PCR釆用絕對(duì)定量的方式，不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本，直接檢測(cè)目標(biāo)序列的拷貝數(shù)，它的原理是通過微液滴數(shù)字PCR技術(shù)結(jié)合Taqman熒光探針技術(shù)，利用微流控生物芯片可以生成數(shù)萬個(gè)納升級(jí)油包水液滴，液滴中包裹了單拷貝模板和PCR反應(yīng)液。每個(gè)微液滴即一個(gè)反應(yīng)單元，經(jīng) PCR 擴(kuò)增后，生物芯片分析儀對(duì)微滴逐個(gè)進(jìn)行熒光強(qiáng)度檢測(cè)。與陰性微滴相比，包含核酸分子的陽(yáng)性微滴的熒光信號(hào)強(qiáng)度增加。每個(gè)反應(yīng)單元所含的模板分子個(gè)數(shù)符合泊松分布數(shù)學(xué)模型，最后通過測(cè)定每個(gè)反應(yīng)單元的熒光信號(hào)并結(jié)合泊松分布計(jì)算岀待測(cè)樣本靶標(biāo)信號(hào)的絕對(duì)拷貝數(shù)。
數(shù)字PCR在腫瘤液體活檢領(lǐng)域可做到風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、早期篩查、病理診斷、伴隨診斷、用藥指導(dǎo)、預(yù)后評(píng)估、療效檢測(cè)、微小殘留監(jiān)測(cè)這些應(yīng)用。
檢測(cè)優(yōu)勢(shì)：
a.無需標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本即可實(shí)現(xiàn)絕對(duì)定量
b.可單分子檢測(cè)，靈敏度高，可達(dá)0.1%
c.終點(diǎn)檢測(cè)，不依賴于Ct值，且對(duì)PCR抑制劑耐受程度高
d.高穩(wěn)定性和較強(qiáng)的抗干擾能力，適用于多種復(fù)雜樣本
e.封閉式防污染設(shè)計(jì)
f.動(dòng)態(tài)檢測(cè)，可重復(fù)性高
g.高信噪比
h.血液檢測(cè)無創(chuàng)，樣本易采集，易復(fù)檢

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